دستورالعمل تست فروکتوز اسپرم

Seminal Plasma Fructose Assay

 

هدف از این تست اندازه گیری مقدار فروکتوز در مایع منی انسان است. فروکتوز در مایع منی منعکس کننده عملکرد ترشحی وزیکول سمینال است. تست فروکتوز ممکن است در ارزیابی تشخیص و مدیریت ناباروری مردان کمک کند.

غلظت فروکتوز در پلاسمای منی به تشخیص آزوسپرمی انسدادی و غیر انسدادی کمک میکند. غلظت فروکتوز در مردان با آزوسپرمی غیر انسدادی معمولا بالاتر یا برابر با مردان بارور می باشد با این حال فروکتوز در مایع منی بیماران مبتلا به ازوسپرمی انسدادی معمولا وجود ندارد و یا به طور قابل توجهی کمتر از مردان بارور است. عدم وجود فروکتوز در بیماران مبتلا نقص در وزیکول وازدفران مادرزادی است.

مواد موجود در کیت:

محلول A (کروموژن): 16 میلی لیتر

محلولB : 160 میلی لیتر

محلول استاندارد : 3 میلی لیتر

نمونه مورد نیاز:

مایع منی

روش کار:

ابتدا نمونه یا مایع منی را با دور  3000 rpm     به مدت 10 دقیقه سانتریفوژ کرده و مایع رویی را جدا کنید. سپس بخشی از مایع رویی را با آب مقطر به نسبت 1 به 2 رقیق نمایید. با استفاده از جدول زیر محلولهای مورد نظر ساخته می شود:

طرز تهیه محلول کار روزانه استاندارد (working solution ) : 900 میکرولیتر آب مقطر+ 100میکرولیتر محلول استاندارد یا برای استفاده کمتر میتوان در حجم های کمتر تهیه شود که در این صورت می توان از رقت (10/1) استفاده کرد

 

لوله Test

لوله استاندارد

لوله بلانک

محلول A

100 میکرولیتر

100میکرولیتر

100میکرولیتر

محلول استاندارد کارروزانه

20 میکرولیتر

نمونه(پلاسمای منی رقیق شده)

20 میکرولیتر

محلول B

20 میکرولیتر

 

پس از ساخت محلول های مورد نظر آنها را داخل انکوباتور C°37 به مدت 45 دقیقه نگه داری میکنیم و سپس در دستگاه اسپکتوفتومتر OD مورد نظر با طول موج nm495  قرائت می گردد.

  • ابتدا دستگاه را با بلانک صفر کرده و سپس اقدام به خوانش OD نمونه ها نمایید.
  • خوانش OD در مقابل بلانک و استفاده از فرمول زیر جهت تعیین غلظت فروکتوز نمونه منی

Ctest(md/dL)=(ODtes/ODst)X400

  • محدوده نرمال : 120-450 (mg/dL)